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細(xì)胞計(jì)數(shù)儀讓細(xì)胞計(jì)數(shù)從此不再繁重
發(fā)布日期:2018-10-30 瀏覽次數(shù):878
細(xì)胞計(jì)數(shù)儀讓細(xì)胞計(jì)數(shù)從此不再繁重
“為了保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞品質(zhì),許多實(shí)驗(yàn)室會(huì)對(duì)細(xì)胞的濃度和活率進(jìn)行檢測(cè),傳統(tǒng)的方法是通過針對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的臺(tái)盼藍(lán)染料,針對(duì)酵母的美蘭染料。兩種染料都是染色細(xì)胞核的,當(dāng)細(xì)胞存活時(shí),膜具有選擇透過性,染料無法進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。當(dāng)細(xì)胞死亡后,膜的選擇透過性失去,染料便可以進(jìn)入細(xì)胞核將細(xì)胞染色。從而區(qū)分出細(xì)胞的死活。傳統(tǒng)的血球計(jì)數(shù)板操作復(fù)雜,誤差大已經(jīng)越來越多的被自動(dòng)化的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀所取代。細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,具有多方面的特性,這項(xiàng)特性保證了計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。”
極其便捷的操作
細(xì)胞計(jì)數(shù)儀操作機(jī)器方便,只需要簡(jiǎn)單的三步就可以完成細(xì)胞濃度活率測(cè)定。
您只需要上樣20微升,將計(jì)數(shù)板插入儀器,點(diǎn)擊開始20秒以內(nèi)就可以得到細(xì)胞的濃度和活率
不需要人工調(diào)焦
基于圖像分析的計(jì)數(shù)儀都需要在正確的焦距下得到清晰的細(xì)胞圖像,進(jìn)而進(jìn)行圖像分析得到計(jì)數(shù)結(jié)果。如果焦距調(diào)整的不正確,將會(huì)嚴(yán)重的影響濃度及死活判斷。下圖就是一些列焦距錯(cuò)誤的圖片,如果焦距調(diào)整不當(dāng),會(huì)嚴(yán)重的影響死活的判斷,影響計(jì)數(shù)結(jié)果的穩(wěn)定性。細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在使用過程中都無需進(jìn)行人工調(diào)焦,極大程度的避免了焦距誤差對(duì)于死活判定的影響。
良好的景深性能
當(dāng)鏡頭對(duì)著某一物體聚焦清晰時(shí),在鏡頭中心所對(duì)的位置垂直鏡頭軸線的同一平面的點(diǎn)都可以在膠片或者接收器上相當(dāng)清晰的圖像,在這個(gè)平面沿著鏡頭軸線的前面和后面一定范圍的點(diǎn)也可以結(jié)成眼睛可以接受的較清晰的像點(diǎn),把這個(gè)平面的前面和后面的所有景物的距離叫做相機(jī)的景深。
對(duì)于細(xì)胞計(jì)數(shù)儀景深的意義在于可以可以在CCD上清晰成像的細(xì)胞懸液的深度。一般的計(jì)數(shù)板都有100-200微米的深度,如果鏡頭的景深性能不佳時(shí),會(huì)使一些在景深范圍以內(nèi)的細(xì)胞無法成像。理想的計(jì)數(shù)儀應(yīng)當(dāng)是可以將整個(gè)計(jì)數(shù)板深度的內(nèi)的細(xì)胞都清晰成像。景深受鏡頭焦距,物距,光圈大小CCD大小的影響。細(xì)胞計(jì)數(shù)儀權(quán)衡各個(gè)因素,設(shè)計(jì)出大景深的成像系統(tǒng),保證計(jì)數(shù)板內(nèi)的細(xì)胞都可以清晰呈像,保證計(jì)數(shù)結(jié)果的穩(wěn)定性與準(zhǔn)確性。
多視野檢測(cè)
將一定體積的細(xì)胞懸液加入恒定的空間內(nèi)時(shí),伴隨恒定空間內(nèi)液體流速的差異,表現(xiàn)為細(xì)胞的分布密度會(huì)有輕微的差異,這個(gè)現(xiàn)象是無法*避免的。在細(xì)胞計(jì)數(shù)之初,人們就考慮到了這個(gè)問題,標(biāo)準(zhǔn)的血球計(jì)數(shù)板操作需要統(tǒng)計(jì)4個(gè)角的細(xì)胞濃度然后求平均值。全系列細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,在大視野大統(tǒng)計(jì)量的基礎(chǔ)上又引入了多視野檢測(cè),可以對(duì)于一個(gè)樣品檢測(cè)多個(gè)視野,軟件自動(dòng)求平均。在下圖中上方live 3平均值,一共統(tǒng)計(jì)了3個(gè)不同的視野,然后自動(dòng)計(jì)算平均值,可以看到下方三個(gè)視野的值高度接近,進(jìn)一步求平均可以*抵消細(xì)胞分布不均引起的誤差。
完善的雜質(zhì)過濾功能
細(xì)胞計(jì)數(shù)儀可以有效區(qū)分細(xì)胞碎片及背景雜質(zhì),排除細(xì)胞碎片,背景雜質(zhì)對(duì)于計(jì)數(shù)結(jié)果的影響。如下圖所示,細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果中細(xì)胞碎片和背景雜質(zhì)被自動(dòng)去除。
在進(jìn)行原代培養(yǎng),或者細(xì)胞消化不*是常常會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞團(tuán)塊。使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí),標(biāo)準(zhǔn)的操作要求將一個(gè)團(tuán)塊技術(shù)為一個(gè)細(xì)胞,但是這并不能表示細(xì)胞懸液的真實(shí)濃度。細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的分析軟件,具有先進(jìn)的算法,可以將團(tuán)塊中的細(xì)胞分辨出來,更加真實(shí)的反應(yīng)您細(xì)胞的濃度與活率。